色谱软件调试峰值通常涉及以下步骤:
设置初始条件
使用90%的乙腈(或甲醇)和10%的水(或缓冲溶液)作为初始流动相比例,以快速获得分离结果。
调整有机溶剂比例
根据出峰情况,逐步调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。每减少10%的有机溶剂,保留因子大约增加3倍。这是一个有效的调整方法,称为三倍规则。
从粗调到微调
当初步分离达到一定程度后,将有机溶剂的调整量从10%的增量调整为5%,并逐渐降低调整率,直至各组分的分离情况不再改变。
调节检测灵敏度
取对照溶液20μl注入液相色谱仪,调节检测灵敏度,使主成分色谱峰的峰高为满量程的20%~25%。
记录和分析色谱图
精密量取供试品溶液和对照品溶液各20μl,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。通过色谱图可以直观地观察各组分的分离情况和峰值位置。
使用色谱软件功能
利用色谱软件(如Empower)的缩放功能,可以调整峰的大小,以便更好地观察和分析峰值。确保仪器具有灵敏度调节功能,并且工作站支持满量程设置,以达到最佳效果。
通过以上步骤,可以有效地调试色谱软件中的峰值,确保色谱分析的准确性和可靠性。建议在实际操作中根据具体情况灵活调整参数,以达到最佳的分离效果。
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